จากเอกสารที่เขียนไว้เพื่อการอบรมเชิงปฏิบัติการ Realtime PCR and its applications หลังจากรู้จักแล้วว่า Realtime PCR คืออะไร ในหัวข้อนี้ ก็เพื่อจะอธิบายแบบง่ายๆให้เข้าใจความแตกต่างกับแบบดั้งเดิมที่ใช้กันมาตั้งแต่ปี 1985 โน่นแน่ะค่ะ
ความแตกต่างระหว่าง Conventional กับ Real-time PCR
ใน PCR แบบธรรมดา (conventional PCR) เราจะไม่สามารถรู้ได้ว่าเกิดอะไรขึ้นระหว่างทาง เราต้องกะประมาณเอาว่าต้องปรับเปลี่ยนอุณหภูมิกี่รอบ จึงจะได้ product ที่เพียงพอต่อการตรวจวัด และต้องมีการ run gel electrophoresis เพื่อตรวจสอบดูทั้งปริมาณและขนาดของ product เมื่อสิ้นสุดปฏิกิริยา ในขณะที่ในระบบ Real-time PCR เราสามารถติดตามดูปฏิกิริยาได้ทุกระยะระหว่างที่กำลังดำเนินอยู่ และสามารถกำหนดจุดที่จะเก็บข้อมูลเพื่อนำมาวิเคราะห์ในภายหลังได้ นอกจากนั้นเรามีวิธีพิสูจน์ตรวจสอบ product ได้โดยใช้วิธีดู melting curve หลังปฏิกิริยา โดยไม่ต้องนำมา run gel อีก
เอาแบบสั้นๆ กันเบื่อ ก่อนที่ต่อตอนหน้าสั้นๆเหมือนกันว่า PCR แบบ Realtime นั้นมีข้อดียังไงบ้างนะคะ
สำหรับข้อมูลก่อนหน้านี้ก็คือ
ดาวน์โหลดเอกสารทั้งฉบับได้ตรงนี้เลยค่ะ Basic RealTime PCR
ไม่มีความเห็น